728x90 전공이야기33 쉽게 할 수 있는 ICC staining 실험 - 세포 표면 단백질 염색 방법 일반적으로 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining)을 수행하는 목적은 세가지 입니다. 첫번째는 타겟 단백질의 세포내 위치 확인하기 위해서, 두번째는 발현시킨 외부유전자의 발현을 확인하기 위해서, 마지막으로 세번째는 2가지 이상의 단백질의 상호간 관련성 (interaction)을 확인 및 검증하는 것입니다. 물론, 한꺼번에 모두 확인할 수도 있습니다. 세포 배양 / 성장 형태, 즉 부유 / 부착 (suspension / adhesion) 세포에 따라, 그리고 타겟 단백질의 발현 위치(세포내)에 따라 적용되는 실험 방법이 조금씩 다릅니다. 이번에는 “현탁액에서 고정되지 않은 세포에 표면 단백질 염색방법” (FACS 적용가능)을 설명합니다. 현탁액에 고정되지 않은 세포 표면 단백질 .. 2023. 4. 25. 초보 연구자들도 쉽게 할 수 있는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법 - 요약 및 정리 오늘은 in vitro 실험에서 빠질 수 없는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법을 소개하고 설명 및 요약하도록 하겠습니다. 실험 목적은 아래와 같습니다. 1. 일반적으로 타겟 단백질이 세포내 어느 위치에 존재하는지 확인 2. 외부 유전자를 발현시킨 단백질에 제대로 발현하는지 확인 3. 단백질 상호간의 관련성 (interaction) 을 확인 4. 1,2,3 번 모두를 동시에 확인 및 검증 실험방법은 아래 세가지 조건에 따라 조금씩 다릅니다. 참고하시기 바랍니다. 1. 세포 배양/성장 형태, 즉 부유 / 부착 (suspension / adhesion) 세포에 따라 적용되는 방법 2. 대상 단백질의 세포내 (혹은 예상되는) 위치가 세포질 / 핵 / 세포막 (cyt.. 2023. 4. 13. PBS buffer (pH 7.0~8.0) 쉽게 만들어 봅시다~^^ Phosphate-buffered saline (PBS) - 사용하는 용도에 따라 D-PBS, PBS (-), PBS (+) 등의 종류가 다양하지만, 실험결과에 큰 영향을 주는 경우는 없음. - 사용상 [반드시 D-PBS 를 사용] 이라는 caution 이 없는 경우 구분없이 사용해도 무방하다. 1. 일반적인 PBS 제조 방법 (pH meter 로 보정) 1X PBS 8 g NaCl 0.2 g KCl 1.44 g Na2HPO4 0.24 g KH2PO4 in 800 ml of distilled H2O. Adjust the pH to 7.4 with HCl. (1N or 3N HCl 사용, 한방울씩 천천히 추가할 것) Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave. 10X PB.. 2023. 1. 17. 이전 1 2 3 4 5 6 7 8 ··· 11 다음 728x90
