PBS buffer (pH 7.0~8.0) 쉽게 만들어 봅시다~^^

Phosphate-buffered saline (PBS)

- 사용하는 용도에 따라 D-PBS, PBS (-), PBS (+) 등의 종류가 다양하지만, 실험결과에 큰 영향을 주는 경우는 없음.

- 사용상 [반드시 D-PBS 를 사용] 이라는 caution 이 없는 경우 구분없이 사용해도 무방하다.

 

1. 일반적인 PBS 제조 방법 (pH meter 로 보정)

1X PBS

• 8 g NaCl
• 0.2 g KCl
• 1.44 g Na2HPO4
• 0.24 g KH2PO4
  in 800 ml of distilled H2O.
• Adjust the pH to 7.4 with HCl. (1N or 3N HCl 사용, 한방울씩 천천히 추가할 것)
• Add H2O to 1 liter. Sterilize by autoclave.

 

10X PBS

• 80g of NaCl
• 2.0g of KCl
• 14.4g of Na2HPO4
• 2.4g of KH2PO4

     Dissolve the following in 800ml distilled H2O.

• Adjust pH to 7.4. (1N or 3N HCl 사용, 한방울씩 천천히 추가할 것)
• Adjust volume to 1L with additional distilled H2O.
• Sterilize by autoclaving.

 

2. 간이 PBS 제조 방법 (pH meter 가 없는 경우 ; 정확성 떨어짐 )

121℃에서 20분간 고압멸균시키거나 0.2 ㎛ pore size filter로 멸균시킨다.

4℃ 냉장고에서 6개월간 보관할 수 있다.

 

Working solutions (사용액)의 제조
저장용액의 pH에 따라 저장용액량을 아래의 표에 준하여 잘 혼합하여 사용한다.

• 0.1 M Na2HPO4 아래 표와 같음
• 0.1 M NaH2PO4 아래 표와 같음
• 8.5% NaCl          100 mL
• 증류수               800 mL

표. PBS 완충액 제조

pH		10x Na2HPO4 (mL)	10x NaH2PO4 (mL)
7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0		39.0 28.8 19.0 13.0  8.5  7.3	61.0 72.0 81.0 87.0 91.5 94.7