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전공이야기33

쉽게 따라할 수 있는 Hemacytometer (cell count) 를 이용한 세포수 측정법 Hemacytometer 를 이용한 세포수 측정 (cell counting) 이란? Hemacytometer (혈구계수계) 를 이용한 세포수 측정방법은 혈액에서 다양한 혈액구성 세포 (적혈구, 백혈구, 혈소판 등)의 수를 측정하기 위해 개발되었다. 하지만, 생명과학 연구 분야에서 동물 세포를 배양하여 다양한 분자생물학적 실험을 진행하고자 할때 동일한 세포의 수를 기준으로 맞춰주기 위하여 세포의 수를 측정하는 방법으로 이용되고 있다. Hemacytometer 는 혈구 계수계(혈구 계수계)라고도 하며, 측면이 돌출된 형태의 유리 챔버로, 챔버 바닥에서 정확히 0.1mm 위에 석영 커버슬립으로 고정합니다. 계수 챔버는 총 표면적이 9 mm^2 (그림 1 참조)로 에칭되어 있습니다. 농도 계산은 커버 슬립 아래.. 2023. 6. 2.
쉽고 간단한 competent cell (E.coli) 제작 방법입니다. Competent cell (E. coli) 이란? 대장균의 형질전환 (plasmid transformation)방법에서 필요하며, 대장균의 세포벽을 침투하기 쉽도록 취약화 처리된 타입의 세포(competent cell)를 이용합니다. 사용할 competent cell은 DNA 삽입후 발현 및 유지 효율이 상이할 수 있으며, 일반적으로 다음과 같은 유형이 있습니다. 각각의 방법은 사용하는 대장균의 유형에 따라 상황에 맞게 선택이 가능합니다. 1. Calcium chloride-heat shock method (CaCl2 method): 대장균의 세포벽을 침투하기 위해 세포 벽의 취약성을 높이는 칼슘 염기처리를 시행하여 변환용 세포를 만드는 방법입니다. 이때 열 충격을 가해서 DNA를 세포 내로 유입시키는.. 2023. 5. 22.
대장균 형질전환 실험 방법 (E.coli Transformation) - DH5α/CaCl2 methods 기준입니다. 플라스미드(plasmid) 를 이용한 대장균의 형질전환 (E. coli Transformation) 플라스미드(plasmid)는 세균 내 유전자 DNA 조각입니다. 이 작은 조각들이 세포 안에서 복제되어 증식하게 되면 생명체처럼 행동하기 시작하는데 이를 형질전환(transformation)이라고 합니다. 플라스미드(plasmid)는 대장균에 외부 유전자를 삽입하기 위해 가장 많이 사용되는 방법 중 하나입니다. 플라스미드를 이용하여 대장균에 유전자를 삽입함으로써 다음과 같은 분자생물학적 의의를 갖습니다. 대장균 내 유전자 삽입 기술은 생명공학 분야에서 중요한 의미를 가지며, 연구 분야에 있어서 매우 유용하게 사용됩니다. 1. 외부 유전자의 대장균 내 전파 - 플라스미드를 이용하여 외부 유전자를 대장균으로 .. 2023. 5. 22.
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