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Cell apoptosis를 확인하는 대표적인 4가지 실험 방법의 원리와 간단한 소개입니다 Cell Apoptosis 란? Cell apoptosis (세포고사)란 세포의 자발적인, 능동적인 세포사멸로, 프로그램된 세포사멸이라고도 합니다. 바이러스나 외부자극에 의한 DNA 손상 등으로 인해 불필요한 세포나 조직이 사라지는 과정입니다. 이 과정은 여러 가지 원인에 의해 유발되며, 세포 내부에서 일어나는 복잡한 신호전달 경로를 거쳐 진행됩니다. apoptotic cell은 DNA 단편화, 세포내 소기관(핵, 미토콘드리아 등)의 변화등의 다양한 특성을 갖습니다. Apoptosis를 확인할 수 있는 실험 방법들로는 DNA fragmentation assay, TUNEL assay, AnnexinV staining, AnnexinV-PI staining FACS analysis 등이 있습니다. 제시한 .. 2023. 6. 9.
쉽게 따라할 수 있는 Hemacytometer (cell count) 를 이용한 세포수 측정법 Hemacytometer 를 이용한 세포수 측정 (cell counting) 이란? Hemacytometer (혈구계수계) 를 이용한 세포수 측정방법은 혈액에서 다양한 혈액구성 세포 (적혈구, 백혈구, 혈소판 등)의 수를 측정하기 위해 개발되었다. 하지만, 생명과학 연구 분야에서 동물 세포를 배양하여 다양한 분자생물학적 실험을 진행하고자 할때 동일한 세포의 수를 기준으로 맞춰주기 위하여 세포의 수를 측정하는 방법으로 이용되고 있다. Hemacytometer 는 혈구 계수계(혈구 계수계)라고도 하며, 측면이 돌출된 형태의 유리 챔버로, 챔버 바닥에서 정확히 0.1mm 위에 석영 커버슬립으로 고정합니다. 계수 챔버는 총 표면적이 9 mm^2 (그림 1 참조)로 에칭되어 있습니다. 농도 계산은 커버 슬립 아래.. 2023. 6. 2.
쉽고 간단한 competent cell (E.coli) 제작 방법입니다. Competent cell (E. coli) 이란? 대장균의 형질전환 (plasmid transformation)방법에서 필요하며, 대장균의 세포벽을 침투하기 쉽도록 취약화 처리된 타입의 세포(competent cell)를 이용합니다. 사용할 competent cell은 DNA 삽입후 발현 및 유지 효율이 상이할 수 있으며, 일반적으로 다음과 같은 유형이 있습니다. 각각의 방법은 사용하는 대장균의 유형에 따라 상황에 맞게 선택이 가능합니다. 1. Calcium chloride-heat shock method (CaCl2 method): 대장균의 세포벽을 침투하기 위해 세포 벽의 취약성을 높이는 칼슘 염기처리를 시행하여 변환용 세포를 만드는 방법입니다. 이때 열 충격을 가해서 DNA를 세포 내로 유입시키는.. 2023. 5. 22.
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