728x90 분류 전체보기61 Plasmid DNA mini-prep.(purification) - 전용 Kits 사용 방법 요약 플라스미드(Plasmid) DNA prep. Kits 란? 플라스미드 DNA를 이용하기 위해서는 박테리아 (E. coli) 에서 분리 정제하는 과정이 필요하고, 이러한 과정을 plasmid DNA preperation (Prep.) 혹은 purification 이라고 하며, 이를 위한 prep. Kits 를 국내외 다양한 회사(promega, invitrogen, Qiagen, GeneAll, CosmoGenetech 등)에서 판매하고 있으며, 상세한 방법은 각 제품마다 조금 차이가 있지만 전반적인 방법에 대해 소개하고자 합니다. 플라스미드 DNA는 박테리아 및 일부 다른 유기체의 염색체 DNA와 분리된 일종의 원형 이중 가닥 DNA 분자입니다. 염색체 DNA와 독립적으로 복제할 수 있는 플라스미드 DN.. 2023. 5. 2. Plasmid DNA preperation(purification) - 플라스미드 DNA 정제 방법 (manually methods) 플라스미드(Plasmid) DNA 란? 플라스미드 DNA는 박테리아 및 일부 다른 유기체의 염색체 DNA와 분리된 일종의 원형 이중 가닥 DNA 분자입니다. 플라스미드는 일반적으로 크기가 몇 킬로베이스에서 수백 킬로베이스로 작으며 염색체 DNA와 독립적으로 복제할 수 있습니다. 전반적으로 플라스미드 DNA는 유전 연구 및 생명 공학에 중요한 도구이며 박테리아에서 자연적으로 발생하는 것은 항생제 내성의 확산과 미생물 군집의 진화에 중요한 의미가 있습니다. 인공적으로 제작된 플라스미드를 흔히 vector 또는 DNA vector 라고 표현하기도 합니다. 이러한 플라스미드의 특징을 이용하여 특정 유전자를 플라스미드에 삽입할 수 있으며 (이를 vector 라 표현함), 이를 박테리아 세포에 도입하여 원하는 유전.. 2023. 5. 2. Cell viability (세포 생존율) 측정 방법 - MTT assay 실험 방법으로 확인 해 봅시다. MTT assay 의 원리 MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 는 정상적으로 살아있는 혹은 증식하는 세포(대사과정이 온전한 세포)에서는 미토콘드리아의 탈수소 효소작용에 의해 수용성의 노란색 MTT 를 비수용성의 MTT formazan (자주색)으로 환원시키게 됩니다. 비수용성인 MTT foramazan을 DMSO 또는 DMF 에 용해시켜 흡광도를 측정할때 파장은 540 nm이며, 측정된 흡광도가 높을 수록 살아있고 대사적으로 왕성한 세포임을 나타냅니다. 장점 : 1) sensitive, 2) accurate, 3) safety, 4) easy & rapid, 5) semiautomatic 등이 있습니다. ※ 1. MTT .. 2023. 4. 26. 이전 1 ··· 3 4 5 6 7 8 9 ··· 21 다음 728x90
