728x90 전공이야기/실험방법24 PCR-Uracil 을 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 Site-directed mutagenesis Site-directed mutagenesis는 특정 DNA 염기서열을 변화시켜, 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있는 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야이다. DNA 재결합시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용하기도 함. promoter나 enhancer 연구에서 어떤 transacting factor가 결합하여 기능을 하는지를 알기 위하여 그 결합 부위의 염기서열을 변화 시켜서 결합을 못하게 한 다음 promoter나 enhancer의 활성을 측정함으로써 그 transacting factor의 중요성을 타진할 수도 .. 2023. 1. 17. PCR-4primers 를 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 Site-directed mutagenesis Site-directed mutagenesis는 특정 DNA 염기서열을 변화시켜, 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있는 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야이다. DNA 재결합시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용하기도 함. promoter나 enhancer 연구에서 어떤 transacting factor가 결합하여 기능을 하는지를 알기 위하여 그 결합 부위의 염기서열을 변화 시켜서 결합을 못하게 한 다음 promoter나 enhancer의 활성을 측정함으로써 그 transacting factor의 중요성을 타진할 수도 .. 2023. 1. 17. Cell cycle analysis [FACS - PI staining] 실험 방법 정리 @ Cell cycle analysis 란? (자세한 설명은 생략) - 세포내 DNA 를 PI 로 염색하여 FACS로 분석하는 방법 I. preparation of PI staining - Wahing buffer : 2% FBS in PBS (or 2% BSA in PBS) / PBS 만 사용 가능 - 1.12% sodium citrate buffer (pH 8.5) - RNase A (50ug/ml in 1.12% sodium citrate buffer pH 8.5) - PI solution (BD Pharmingen Cat. #550825) * PI solution 조성 (만들어 사용 가능) PI 50 ug/ml (stock sol. 5 mg/ml) Sodium citrate 0.1 % (stock.. 2023. 1. 17. 이전 1 ··· 3 4 5 6 7 8 다음 728x90
