728x90 Transformation3 대장균 형질전환 실험 방법 (E.coli Transformation) - DH5α/CaCl2 methods 기준입니다. 플라스미드(plasmid) 를 이용한 대장균의 형질전환 (E. coli Transformation) 플라스미드(plasmid)는 세균 내 유전자 DNA 조각입니다. 이 작은 조각들이 세포 안에서 복제되어 증식하게 되면 생명체처럼 행동하기 시작하는데 이를 형질전환(transformation)이라고 합니다. 플라스미드(plasmid)는 대장균에 외부 유전자를 삽입하기 위해 가장 많이 사용되는 방법 중 하나입니다. 플라스미드를 이용하여 대장균에 유전자를 삽입함으로써 다음과 같은 분자생물학적 의의를 갖습니다. 대장균 내 유전자 삽입 기술은 생명공학 분야에서 중요한 의미를 가지며, 연구 분야에 있어서 매우 유용하게 사용됩니다. 1. 외부 유전자의 대장균 내 전파 - 플라스미드를 이용하여 외부 유전자를 대장균으로 .. 2023. 5. 22. QIAGEN plasmid midi-prep. kits 사용, 실험 방법 요약입니다. 플라스미드(Plasmid) DNA Midi-prep. Kits 란? 플라스미드 DNA를 이용하기 위해서는 박테리아 (E. coli) 에서 분리 정제하는 과정이 필요합니다만, 일반적으로 plasmid recombinant 를 위한 cloning 과정에서는 mini-prep 을 많이 사용하게 되지만, 세포나 박테리아에 형질 전환(transduction) 또는 형질도입(transformation) 등으로 발현 세포주 (stable cell line) 제작을 위해서는 대용량 및 고순도의 plasmid DNA (vector) 가 필요합니다. 따라서, 이러한 과정을 용이하게 하기 위해 대량의 E. coli 배양 산물 (50~100 ml)에서 plasmid DNA preperation (Prep.) 혹은 purifi.. 2023. 5. 2. PCR-Dpn I 을 이용한 Site-directed mutagenesis 실험 방법 정리 Site-directed mutagenesis Site-directed mutagenesis는 특정 DNA 염기서열을 변화시킴을 의미하는, 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야이다. 즉 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있다. 또 DNA 재결합시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용되기도 한다. 또한 promoter나 enhancer 연구에서 어떤 transacting factor가 결합하여 기능을 하는지를 알기 위하여 그 결합 부위의 염기서열을 변화 시켜서 결합을 못하게 한 다음 promoter나 enhancer의 활성을 측정함으로써 그 transacting facto.. 2022. 12. 6. 이전 1 다음 728x90
