728x90 실험방법3 초보 연구자들도 쉽게 할 수 있는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법 - 요약 및 정리 오늘은 in vitro 실험에서 빠질 수 없는 ICC 염색 (ImmunoCytoChemistry Staining) 실험 방법을 소개하고 설명 및 요약하도록 하겠습니다. 실험 목적은 아래와 같습니다. 1. 일반적으로 타겟 단백질이 세포내 어느 위치에 존재하는지 확인 2. 외부 유전자를 발현시킨 단백질에 제대로 발현하는지 확인 3. 단백질 상호간의 관련성 (interaction) 을 확인 4. 1,2,3 번 모두를 동시에 확인 및 검증 실험방법은 아래 세가지 조건에 따라 조금씩 다릅니다. 참고하시기 바랍니다. 1. 세포 배양/성장 형태, 즉 부유 / 부착 (suspension / adhesion) 세포에 따라 적용되는 방법 2. 대상 단백질의 세포내 (혹은 예상되는) 위치가 세포질 / 핵 / 세포막 (cyt.. 2023. 4. 13. Cell cycle analysis [FACS - PI staining] 실험 방법 정리 @ Cell cycle analysis 란? (자세한 설명은 생략) - 세포내 DNA 를 PI 로 염색하여 FACS로 분석하는 방법 I. preparation of PI staining - Wahing buffer : 2% FBS in PBS (or 2% BSA in PBS) / PBS 만 사용 가능 - 1.12% sodium citrate buffer (pH 8.5) - RNase A (50ug/ml in 1.12% sodium citrate buffer pH 8.5) - PI solution (BD Pharmingen Cat. #550825) * PI solution 조성 (만들어 사용 가능) PI 50 ug/ml (stock sol. 5 mg/ml) Sodium citrate 0.1 % (stock.. 2023. 1. 17. RT-PCR (Revers Transcription PCR) 실험 방법 정리 RT-PCR (Revers Transcription PCR) 이란? 생물학적 샘플 (세균, 세포, 조직, 바이러스 등) 에서 특정 RNA 분자를 검출하고 정량화하는 데 널리 사용되는 실험실 기법입니다. RNA 분자가 역전사라는 과정(역전사 효소를 사용하여)을 통해 상보적 DNA(cDNA)로 합성되고결과물인 cDNA는 원본 RNA 분자의 안정적인 사본 역할을 하며 검출을 위해 쉽게 증폭할 수 있습니다. 다음과 같은실험에 응용할 수 있습니다. 1. 특정 단백질의 RNA 수준 (mRNA; transcription) 에서의 발현량 확인 2. 특정 단백질을 암호화하고 있는 gene 또는 mRNA 의 분리 3. 특정 시료를 처리한 후 특정 단백질의 mRNA 수준에서의 발현량 비교 등 원리는 옆 그림을 참조하세요. .. 2022. 12. 6. 이전 1 다음 728x90
